Підбір та оптимізація методу виділення та очищення ДНК з видів роду Corylus для ПЛР аналізу

Анотація

Мета.Застосування методів молекулярно-генетичного аналізу потребує препаратів ДНК високої чистоти. Однак, у випадку рослин ліщини (Corylus spp.) отримання ДНК належної якості ускладнене наявністю в листковій тканині значної кількості вторинних метаболітів. Мета роботи полягала у підборі та оптимізації методу виділення та очищення ДНК з ліщини для подальшого використання в ПЛР-аналізі. Методи. Використано три методи виділення ДНК з цетавлоном в якості детергенту, які відрізняються особливостями очищення ДНК: загальноприйнятий метод за Doyle, Doyle, 1987, модифікований метод з очищенням на мікрочастинках діоксиду кремнію та метод з екстракцією розчинних метаболітів, яка передує виділенню ДНК. Результати. Показано непридатність перших двох методів для виділення ДНК з сухого листя ліщини внаслідок високої кількості вторинних метаболітів в отриманих препаратах. Встановлено, що останній метод дозволяє видалити значну частину водорозчинних органічних речовин на перших етапах і отримати якісні препарати ДНК. Висновки. Підібрано та оптимізовано метод виділення ДНК з рослин видів та гібридів Corylus spp., який дозволяє отримати з висушеної листкової тканини в достатній кількості якісну високомолекулярну ДНК, придатну для подальшого використання в молекулярногенетичному аналізі із застосуванням ПЛР.