Молекулярно-генетичний аналіз поліморфних локусів c.454-397T/C та с.454-351А/G гена рецептора естрогенів ESR1 у сімейних пар із ідіопатичним безпліддям
Анотація
Мета: встановити асоціацію поліморфних локусів 397 T>C та 351 A>G гена ESR1 з невдалими екстракорпоральними заплідненнями (ЕКЗ) у подружніх пар. Методи. Виділення та очищення ДНК проводили методом висолювання. Ампліфікацію послідовностей ДНК in vitro проводили, використовуючи метод полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР). Для ідентифікації мутацій генів естрогенового рецептора застосовували метод рестрикційного аналізу продуктів ПЛР відповідних послідовностей. Електрофорез продуктів ПЛР проводили в 2 % агарозному гелі. Результати. Проведено молекулярно-генетичне дослідження поліморфних варіантів c.454–397 T>C (PvuII) та c.454–351 T>C (XbaI) гена ESR1 у 23 подружніх пар з ідіопатичним безпліддям та невдалими ЕКЗ та 15 подружніх пар у яких двоє і більше дітей і які не мали репродуктивних порушень в анамнезі та випадків ЕКЗ. Встановлено розподіл генотипів та алелів c.454–397 T>C та c.454–351 T>C (XbaI) гена ESR1, проведено статистичні обрахунки. Виявлено тенденцію підвищення частоти генотипу ESR1 453–397TT (pp) серед подружніх пар з невдалими ЕКЗ (32,6 %) у порівнянні з парами контрольної групи (23,3 %), що збільшує ризик невдалих ЕКЗ у 1,59 рази та генотипу c.454–351 AА(хх) серед подружніх пар з невдалими ЕКЗ (39,1 %) у порівнянні з парами контрольної групи (23,3 %), що збільшує ризик невдалих ЕКЗ у 2,11 рази. Встановлено статистично вірогідні відмінності у частотах алелів G (Х) та А (х) локусу c.453–351 A>G гена ESR1 у досліджуваних групах пацієнтів (χ2=3,72, р≤0,05). Обчислення показника відношення шансів виявило асоціацію алеля А(х) із вірогідним зростанням невдалих ЕКЗ у 1,91 рази при довірчому інтервалі 0,99–3,7. Висновки. Одним із генетичним чинників, який асоціюється із збільшеним ризиком виникнення невдалих ЕКЗ є наявність в генотипі алелі А(х) поліморфного локусу c.453–351 A>G гена ESR1.
Ключові слова: ген ESR1, ЕКЗ, естрогеновий рецептор, ідіопатичне безпліддя, молекулярно–генетичне дослідження.
Посилання
Dohle G.R., Jungwirth A., Colpi G. et al. Guidelines on Male Infertility. European Association of Urology. 2007. P. 1–70.
Matthews J., Gustafsson J.A. Estrogen signaling: a subtle balance between ER alpha and ER beta. Mol Interv. 2003. Vol. 3(5). P. 281–292. doi: 10.1124/mi.3.5.281
Yaghmaie F., Saeed O., Garan S.A. et al. Estrogen receptor-alpha immunoreactivity in the arcuate hypothalamus of young and middle-aged female mice. Neuroendocrinology Letters. 2010. –Vol. 31(1). P. 15.
Shim G.J., Kis L.L., Warner M. et al. Autoimmune glomerulonephritis with spontaneous formation of splenic germinal centers in mice lacking the estrogen receptor alpha gene. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2004. Vol. 101(6). P. 1720-1724. doi: 10.1073/pnas.0307915100
Meurs J., Schuit S., Weel A. Association of 5’ prime estrogen receptor alpha gene polymorphisms with bone mineral density, vertebral bone area and fracture risk. Hum. Molec. Genet. 2003. Vol. 12(14). P. 1745–1754. doi: 10.1093/hmg/ddg176
Kjaergaard A., Ellervik C., Tybjaerg–Hansen A. et al. Estrogen receptor alpha polymorphism and risk of cardiovascular disease, cancer, and hip fracture: cross-sectional, cohort, and case-control studies and a meta-analysis. Circulation. 2007. Vol. 115(7). P. 861–871. doi: 10.1161/circulationaha.106.615567
Lawlor D., Timpson N., Ebrahim S. et al. The association of oestrogen receptor alpha-haplotypes with cardiovascular risk factors in the British Women's Heart and Health Study. Eur. Heart J. 2006. Vol. 27(13). P. 1597–1604. doi: 10.1093/eurheartj/ehi833
Alcazar L., Arakaki P., Godoy-Santos A. et al. Estrogen receptor polymorphism and its relationship to pathological process. Am. J. Med. Sci. 2010. Vol. 340. P. 128–132. doi: 10.1097/MAJ.0b013e3181d4eb5d
Molvarec A., Széplaki G., Kovacs M. et al. Estrogen receptor alpha (ESR1) PvuII and XbaI gene polymorphisms in ischemic stroke in a Hungarian population. Clin. Chim. Acta. Eur. Heart J. 2007. Vol. 382(1-2). P. 100–105. doi: 10.1016/j.cca.2007.04.003
Safarinejad M., Shafiei N., Safarinejad S. Association of polymorphisms in the estrogen receptors alpha, and beta (ESR1, ESR2) with the occurrence of male infertility and semen parameters. J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 2010. Vol. 122(4). P. 193–203. doi: 10.1016/j.jsbmb.2010.06.011
Макух Г. В., Заставна Д.В., Тиркус М. Я. Пат. 32044 UA, МПК G01N33/49 (2006.01) Спосіб виділення ДНК з лейкоцитів периферійної крові / Макух Г. В., Заставна Д.В., Тиркус М.Я. [та ін.], заявник ДУ «Інститут спадкової патології АМНУ». № u200801896; заявл. 14.02.2008; опубл. 25.04.2008, Бюл. №8.
Mc. Pherson M. J., Quirke P., Taylor G.R. PCR a Practical Approach. New York: Oxford University press, 1993. 253 p.
Boroumand M., Ghasemi Y., Shiraniet S. et al. Association between estrogen receptor–alpha PvuII and XbaI gene polymorphisms with extracranial carotid stenosis. Labmedicine. 2011. Vol. 42(11). P. 663–667. doi: 10.1309/LM4YRRFCMS2K6DPJ
Лівшиць Г.Б., Кучеренко А.М., Подлєсна С.С. Аналіз алельного поліморфізму гена ESR1 серед населення України. Цитологія і генетика. 2012. Т. 46, № 4. С. 31–39.
