Фосфорилювання сайтів Tyr білка USP1 у клітинах К562 як фактор прогресії хронічної мієлоїдної лейкемії

  • С. В. Антоненко Інститут молекулярної біології і генетики НАН України, Україна, 03143, м. Київ, вул. Академіка Заболотного, 150
  • Ю. Л. Поліщук Інститут молекулярної біології і генетики НАН України, Україна, 03143, м. Київ, вул. Академіка Заболотного, 150
  • Г. Д. Телегєєв Інститут молекулярної біології і генетики НАН України, Україна, 03143, м. Київ, вул. Академіка Заболотного, 150
DOI: https://doi.org/10.7124/visnyk.utgis.17.2.1214

Анотація

Мета. Вивчити особливості фосфорилювання білка USP1 за Tyr у клітинах К562. Методи. Біоінформатичний аналіз сайтів фосфорилювання білка USP1 за допомогою програмного забеспечення KinasePhos. Коімунопреципітація, Western blot аналіз. Імунофлюорисцентний аналіз та конфокальна мікроскопія. Результати. Передбачено потенційні сайти фосфори лювання білка USP1 за Tyr. Виявлено фосфорильовану форму білка USP1 за сайтами тирозину у клітинах К562. За допомогою імунофлуорисцентного аналізу та конфокальної мікроскопії встановлено, що фосфорилювана за Tyr форма білка USP1 локалізується у ядрі клітини. Висновки. Ми вважаємо, що фосфорилювання білка USP1 за Tyr, є наслідком взаємодії із онкобілком Bcr-Abl, який має високу кіназну активність. Фосфорилювання білка USP1 може підвищу вати деубіквітинуючу активність білка, таким чином запобігати протеосомній деградації онкобілка Bcr-Abl в клітині та сприяти прогресуванню захворювання.
Ключові слова: хронічна мієлоїдна лейкемія, Bcr-Abl, USP1, Tyr сайт фосфорилювання.

Посилання

Antonenko S. V., Gurianov D. S, Тelegeev G. D. Colocalization of USP1 and РН domain of BcrAbl oncoprotein in terms of cronic myeloid leukemia cell rearrangements. Cytology and genetics. 2016. V. 50(4). P: 11–5. doi: 10.3103/S0095452716050 029.

Deininger M. W., Goldman J. M., Melo J. V. The molecular biology of chronic myeloid leukemia. Blood. 2000. V. 96. P: 3343–3356.

Fraile J. M., Quesada V., Rodriguez D., Freije J. M., Lopez-Otin C. Deubiquitinases in cancer: new functions and therapeutic options. Oncogene. 2012. V. 31. Р. 2373–2388. doi: 10.1038/onc.2011.443.

Iraia García-Santisteban, Godefridus J. Peters, Elisa Giovannetti, Jose Antonio Rodríguez USP1 deubiquitinase: cellular functions, regulatory mechanisms and emerging potential as target in cancer therapy. Molecular Cancer. 2013. V. 12. P. 9. doi: 10.1186/1476-4598-12-91.

Jalkanen S., Lahesmaa-Korpinen A., Heckman C. Phosphoprotein profiling predicts response to tyrosine kinase inhibitor therapy in chronic myeloid leukemia patients. Experimental hematology. 2012. V: 40 (9) P: 705–714. e3. doi: 10.1016/j.exphem.2012.05.010.

Kang Z. J., Liu Y. F., Xu L. Z., Long Z. J., Huang D., Yang Y., Liu B., Feng J. X., Pan Y. J., Yan J. S., Liu Q. The Philadelphia chromosome in leukemogenesis. Chin J Cancer. 2016 V.35:48. doi: 10.1186/s40880-016-0108-0.

Miroshnychenko D., Dubrovska A., Maliuta S., Telegeev G., Aspenström P. Novel role of pleckstrin homology domain of the Bcr-Abl protein: Analysis of protein-protein and protein-lipid interactions. Exp Cell Res. 2010. V. 316(4). P. 530–542. doi: 10.1016/j.yexcr.2009.11.014.

Olazabal-Herrero A., García-Santisteban I., Rodrí- guez J. A. Structure-function analysis of USP1: insights into the role of Ser313 phosphorylation site and the effect of cancer-associated mutations on autocleavage. Mol. Cancer. 2015 V. 14. P. 33. doi: 10.1186/s12943-015-0311-7.

Sun H., Kapuria V., Peterson L. F., Fang D., Bornmann W. G., Bartholomeusz G., Talpaz M., Donato N. J. Bcr-Abl ubiquitination and Usp9x inhibition block kinase signaling and promote CML cell apoptosis. Blood. 2011 V.117(11). P: 3151–62. doi: 10.1182/blood-2010-03-276477.

Xiomaris M. Cotto-Rios, Mathew J. K. Jones, Tony T. Huang. Insights into phosphorylation-dependent mechanisms regulating USP1 protein stability during the cell cycle. Cell Cycle. 2011. V.10:23. P: 4009–4016. doi: 10.4161/cc.10.23.18501.

Zhongxia Yu, Hui Song, Mutian Jia, Jintao Zhang, Wenwen Wang, Qi Li, Lining Zhang, Wei Zhao USP1-UAF1 deubiquitinase complex stabilizes TBK1 and enhances antiviral responses. JEM. 2017, doi: 10.1084/jem.20170180.