Дослідження прояву трансгенів після Agrobacterium-опосередкованої трансформації in planta пшениці Triticum aestivum L.

Н. А. Жалій, М. О. Банникова, М. О. Плугатар, Л. Г. Великожон, А. М. Тараненко, Б В. Моргун

Анотація


Мета. Виявлення послідовностей цільових трансгенів nptII і bar у геномі ймовірних трансформантів пшениці м’якої озимої Triticum aestivum L. сортів Зимоярка та Подолянка, отриманих в результаті Agrobacterium-опосередкованої трансформації in planta, і з’ясування рівня їх експресії. Методи. Використовували метод полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) самостійно тау поєднанні із зворотною транскрипцією (ЗТ-ПЛР), електрофорез ДНК у агарозному гелі. Толерантність до гербіциду оцінювали у фізіологічному тесті. Результати. За допомогою ПЛР-аналізу послідовність трансгена nptII виявлено у 30 зразках із 145 проаналізованих, частота трансформації склала 20,7 %. Послідовність гена bar спостерігалася у 85 дослідних рослинах, а частота трансформації склала 15,6 %. Виявлено мРНК обох трансгенів, що засвідчило їх транскрипційну активність та стабільну експресію. Висновки. Порівнюючи частоти трансформації обох трансгенів можна стверджувати про дещо вищу ефективність генетичної конструкції з nptII геном. Разом з тим, стабільна транскрипційна активність дає підстави констатувати успішне функціонування обох трансгенів в цілому, хоча і не у кожній конкретно взятій рослині (позиційний ефект). За результатами фізіологічного тесту 25 % рослин, що містять ген bar, виявили стійкість до гербіциду Баста®.
Ключові слова: генетично модифіковані організми, трансгенні рослини, біотехнологічні культури, пшениця м’яка озима, генетична інженерія.

Повний текст:

PDF

Посилання

  • Поки немає зовнішніх посилань.